Hot start primer block PCR master mix 2x(Dye plus) (Yekta Tajhiz)(1ml)
توضیحات
این محصول یک Hot start primer block PCR master mix 2x(Dye plus) با حجم ۱ میلیلیتر، تولید شده توسط برند یکتا تجهیز آزما است. این مسترمیکس آماده مصرف، تمامی اجزای لازم برای انجام واکنشهای PCR را در غلظت 2X فراهم میآورد. با بهرهگیری از تکنولوژی هات استارت، این کیت به گونهای فرموله شده که از تکثیر غیراختصاصی در دماهای پایین جلوگیری کرده و از تشکیل پرایمر دایمرها (primer-dimers) به طور موثری پیشگیری میکند، که این امر منجر به افزایش چشمگیر ویژگی (specificity) و راندمان (yield) واکنش PCR میشود.
افزودن رنگ الکتروفورز به این مسترمیکس (Dye plus)، امکان بارگذاری مستقیم محصول PCR بر روی ژل آگارز را فراهم آورده و نیاز به افزودن جداگانه رنگ را مرتفع میسازد، که باعث صرفهجویی در زمان و کاهش خطاهای احتمالی میگردد. این مسترمیکس ایدهآل برای کاربردهای روتین PCR، تشخیصهای دقیق و تحقیقاتی است که نیاز به حساسیت و ویژگی بالا دارند.
ویژگیها و مزایا
- تکنولوژی هات استارت (Hot Start): جلوگیری از تکثیر غیر اختصاصی و تشکیل پرایمر دایمرها در دماهای پایین، که نتیجه آن افزایش ویژگی و راندمان واکنش PCR است.
- Primer Block: مکانیزم پیشرفته برای مهار تشکیل دایمرهای پرایمر و افزایش هرچه بیشتر ویژگی واکنش.
- غلظت 2X و آماده مصرف: حاوی تمام اجزای ضروری شامل آنزیم Taq پلیمراز Hot Start، dNTPs، بافر واکنش، MgCl2 و رنگ بارگذاری. آمادهسازی آسان واکنش و کاهش خطای پیپتاژ.
- Dye Plus (همراه با رنگ بارگذاری): امکان بارگذاری مستقیم محصول PCR بر روی ژل الکتروفورز بدون نیاز به افزودن جداگانه رنگ، صرفهجویی در زمان و کاهش مراحل کار.
- حساسیت و ویژگی بالا: ایدهآل برای تکثیر قطعات DNA هدف با کمترین خطا و بیشترین دقت.
- حجم ۱ میلیلیتر: مناسب برای آزمایشگاههایی با حجم کاری متوسط تا زیاد.
- برند معتبر یکتا تجهیز آزما: اطمینان از کیفیت و عملکرد محصول.
نکات استفاده و پروتکل پیشنهادی
آمادهسازی واکنش PCR
برای دستیابی به بهترین نتایج با Hot start primer block PCR master mix 2x(Dye plus)، توصیه میشود از پروتکل زیر پیروی کنید:
در یک لوله PCR استریل (۰.۲ یا ۰.۵ میلیلیتر)، اجزای زیر را به ترتیب اضافه کنید:
| جزء | حجم در هر واکنش (۲۵ میکرولیتر) |
|---|---|
| Hot start primer block PCR master mix 2x(Dye plus) | ۱۲.۵ میکرولیتر |
| Primer Forward (10 µM) | ۰.۵-۱.۰ میکرولیتر |
| Primer Reverse (10 µM) | ۰.۵-۱.۰ میکرولیتر |
| DNA الگو | ۱-۵۰ نانوگرم |
| آب عاری از نوکلئاز | حجم را به ۲۵ میکرولیتر برسانید |
پس از افزودن تمام اجزا، لوله را به آرامی هم زده، سپس کوتاه اسپین کنید تا قطرات به انتهای لوله جمع شوند.
چرخه حرارتی پیشنهادی
چرخه حرارتی زیر به عنوان یک نقطه شروع توصیه میشود. دما و زمان ممکن است بسته به DNA الگو و پرایمرها نیاز به بهینهسازی داشته باشند:
- پیشدنچراسیون اولیه: ۹۵°C برای ۵ دقیقه (برای فعال کردن آنزیم Hot Start)
- چرخهها (۳۰-۳۵ چرخه):
- دنچراسیون: ۹۵°C برای ۱۵-۳۰ ثانیه
- اتصال پرایمر (Annealing): 55-65°C برای ۱۵-۳۰ ثانیه (بهینه سازی شود)
- افزایش طول (Extension): 72°C برای ۱۵ ثانیه تا ۱ دقیقه (بستگی به طول محصول)
- افزایش طول نهایی: ۷۲°C برای ۵ دقیقه
- نگهداری: ۴°C
سوالات متداول
آیا این مسترمیکس برای Multiplex PCR مناسب است؟
بله، به دلیل ویژگی بالا و مکانیزم Primer Block، این مسترمیکس میتواند برای Multiplex PCR نیز مناسب باشد، اما ممکن است نیاز به بهینهسازی بیشتر پرایمرها و شرایط واکنش داشته باشد.
چگونه باید این محصول را نگهداری کرد؟
برای حفظ حداکثر فعالیت، محصول را در دمای ۲۰- درجه سانتیگراد نگهداری کنید. از چرخههای مکرر انجماد و ذوب شدن جلوگیری کنید. پس از باز شدن، در صورت استفاده مکرر، توصیه میشود آن را به آیکوتهای کوچک تقسیم کرده و در فریزر نگهداری کنید.
آیا نیاز به افزودن MgCl2 جداگانه است؟
خیر، این مسترمیکس حاوی غلظت بهینه MgCl2 است. با این حال، در برخی موارد خاص، ممکن است نیاز به بهینهسازی غلظت MgCl2 با افزودن محلول استوک جداگانه باشد.
-
ارسال سریع -
اصالت و سلامت فیزیکی کالا
-
پشتیبانی ویژه
نقد و بررسیها
هنوز بررسیای ثبت نشده است.